Реакция кумбса прямая что это
Реакция кумбса прямая что это
Скрининговое лабораторное исследование, позволяющее выявить фиксированные на эритроцитах аутоантитела разных классов, которые играют основную роль в разрушении клеток при гемолитических анемиях.
Прямой антиглобулиновый тест, ПАГТ, прямой тест Кумбса, прямая реакция Кумбса.
Direct antiglobulin test (DAT) with polyspecific antihuman globulin (AHG), Direct Coombs Test, Direct Anti-human Globulin Test.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Общая информация об исследовании
Аутоиммунные гемолитические анемии характеризуются выработкой антител к эритроцитарным антигенам с последующим разрушением эритроцитов вследствие фагоцитоза или активации системы комплемента.
Таким образом, в качестве лабораторных маркеров аутоиммунного гемолиза целесообразно использовать выявление фиксированных на эритроцитах антител классов IgM и IgG, а также С3 компонента комплемента. В зависимости от эффекта, который аутоантитела оказывают на эритроциты в пробирке, выделяют гемолизины (разрушают клетки) и агглютинины (вызывают склеивание эритроцитов между собой). На способности аутоантител in vitro, то есть в пробирке, вызывать агглютинацию эритроцитов и построено большинство лабораторных методик их выявления.
Современным методом постановки прямого антиглобулинового теста является реакция агглютинации в геле. Используемый в реакции полиспецифический антиглобулиновый реагент содержит антитела к иммуноглобулинy G и к С3 компоненту системы комплемента человека, а также может реагировать с IgA и IgM молекулами. В микропробирки с гелем, содержащим антиглобулиновый реагент, добавляют суспензию исследуемых эритроцитов и центрифугируют. При наличии на поверхности эритроцитов аутоантител они связываются с реагентом, что приводит к агглютинации эритроцитов между собой. В процессе центрифугирования происходит разделение агглютинированных и неагглютинированных эритроцитов. Неагглютинированные эритроциты имеют размер, сравнимый с размером частиц геля, и свободно проходят сквозь них под действием центробежной силы, формируя на дне микропробирки компактный осадок красного цвета, а агглютинированные эритроциты ввиду больших размеров задерживаются на поверхности геля или в его толще.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Антиэритроцитарные антитела к IgG и C3d-компоненту комплемента не обнаружены.
Норма – клетки образуют компактный осадок на дне микропробирки.
Агглютинированные клетки образуют красный слой на поверхности или в толще геля.
Клинический (общий) анализ крови
Билирубин (общий, прямой, непрямой)
Кто назначает исследование?
Гематолог, трансфузиолог, терапевт, врач общей практики, ревматолог, педиатр.
Williams Hematology. 9th edition. By: Kenneth Kaushansky, Marshall Lichtman, Josef Prchal, Marcel M. Levi, Oliver Press, Linda Burns, Michael Caligiuri. McGraw-Hill Education, 2016. Pages 832-836.
Henry’s Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 23e by Richard A. McPherson MD MSc (Author), Matthew R. Pincus MD PhD (Author). St. Louis, Missouri : Elsevier, 2016. Pages 716–719.
Антиглобулиновый тест. Прямая и непрямая реакция Кумбса.
1. Что такое антиглобулиновый тест, или реакция Кумбса?
Антиглобулиновый тест, или реакция Кумбса проводится для того, чтобы выявить определенные антитела, которые атакуют красные кровяные клетки (эритроциты).
Антитела это белки, производимые иммунной системой. Как правило, антитела связываются с посторонними веществами, такими как бактерии и вирусы, и уничтожают их.
2. Зачем нужен тест на антитела?
Тест на антитела может проводиться в следующих случаях:
Перед переливанием крови
Вы наверняка знаете, что у человека может быть одна из четырех групп крови. И антиглобулиновый тест можно проводить для определения возможности переливания крови. Если вам делают переливание, кровь донора должна соответствовать вашему типу (иметь одинаковые антигены). Если при переливании антигены отличаются, иммунная система разрушит перелитые клетки. Это может привести к серьезным заболеваниям и даже смерти. Именно поэтому поиск нужного типа крови является столь важным фактором.
Для выявления риска резус-сенсибилизации
Женщине с отрицательным резус-фактором крови могут провести инъекцию анти-Rh- гаммаглобулина (например, RhoGAM), используемого для предотвращения развития Rh- гемолитической болезни.
Для диагностики аутоиммунной гемолитической анемии
Аутоиммунная гемолитическая анемия является редким заболеванием, связанным с образованием антител к собственным антигенам эритроцитов.
3. Типы антиглобулиновой пробы
Существуют два типа антиглобулиновой пробы, или реакции Кумбса: прямой и непрямой.
Прямая реакция Кумбса, или прямой антиглобулиновый тест обнаруживает антитела, связанные с эритроцитами. Он используется для определения анемии. При этой болезни эритроциты разрушаются быстрее, чем производятся.
Непрямая реакция Кумбса, или непрямой антиглобулиновый тест проводится для поиска антител, не связанных с эритроцитами. Для пробы используется сыворотка крови, в которой и находятся антитела. Эта процедура достаточно редкая: в основном ее проводят для определения возможности переливания крови или как этап обследования беременных женщин.
4. Результаты реакции Кумбса
Отклонение от нормы:
Проба Кумбса
Поликлиника Отрадное предлагает сдать анализ в наиболее удобном для вас месте: в условиях клиники или на дому.
Анализ на пробу Кумбса выполняется в течение 1 дня и в стандартном режиме будет готов через сутки после взятия крови. Все данные автоматически высылают на электронную почту пациента, указанную при регистрации в клинике.
Показания к проведению пробы
Из множества существующих антигенов в медицинской практике наибольшее значение уделяется трем типам агглютиногенов крови. Одним из них является тип ответственный за проявление резус-фактора: если он присутствует на мембране эритроцита, диагностируют Rh+ группу крови, если отсутствует – Rh-. Если в состав резус-отрицательной крови попадают эритроциты с агглютиногенами Rh+, организм запускает реакцию иммунного ответа и начинает вырабатывать антитела к этому антигену, что становится причиной патологических состояний.
Справка! Резус-фактор — сложная многокомпонентная система из нескольких десятков антигенов. Наиболее часто встречаемые из них — агглютиногены типа D (85% случаев), а также E и C.
Пробу Кумбса проводят только при наличии прямых показаний. Общий список причин для назначения пробы Кумбса:
Более конкретные показания зависит от типа проводимого исследования.
Прямая проба Кумбса
Прямой тест позволяет обнаружить антитела на поверхности эритроцитов. Это необходимо для диагностики уже имеющихся гемолитических патологий:
Гемолиз кровяных элементов наблюдается при онкологических, инфекционных, ревматических заболеваниях, поэтому прямая проба Кумбса может использоваться как дополнительное средство диагностики патологического состояния. При этом стоит помнить: отрицательное значение анализа не исключает вероятность гемолиза, а является поводом для дополнительного обследования.
Непрямая проба Кумбса
Непрямая проба чаще применяется для предотвращения патологических ситуаций. Она помогает выявить антитела в плазме крови, что необходимо для оценки совместимости при переливании и диагностики рисков резус-конфликта во время беременности.
Проба Кумбса при ведении беременности
Более 80% людей имеют положительный резус-фактор (Rh+), соответственно, чуть менее 20% являются резус-отрицательными. Если у Rh- матери развивается Rh+ ребенок, ее организм начинает вырабатывать антитела, атакующие эритроциты плода, провоцируя гемолиз.
С учетом того, что процент “разнорезусных” браков достигает 12-15%, риск гемолитической болезни новорожденных должен быть велик, но в реальности лишь в 1 из 25 подобных случаев у женщин наблюдается явление сенсибилизации (на 200 успешных родов 1 пример гемолитической патологии). Частично это обусловлено тем, что первый резус-положительный ребенок обычно не вызывает открытой агрессии организма матери; подавляющее количество случаев приходится на второго и последующих детей. Действует тот же принцип, что и при обычной сенсибилизации к тому или иному аллергену.
При первом контакте реакции не происходит. Организм только знакомится с новым для него антигеном, вырабатывая антитела класса IgМ, которые отвечают за быстрый иммунный ответ, но редко проникают через плацентарный барьер в кровь ребенка. Все патологические реакции проявляются при повторной “встрече”, когда в организме начинают вырабатываться антитела класса IgG, легко проникающие в кровоток плода, запуская процесс гемолиза.
Непрямая проба Кумбса при беременности позволяет обнаружить наличие антител в организме матери и вовремя выявить начальную стадию сенсибилизации. Положительный ответ, требует постановки на учет с ежемесячным исследованием титра антител и обязательной госпитализацией за 3-4 недели до родов.
Справка! Несовместимость по резус-фактору на состоянии матери никак не сказывается, гемолитическая болезнь развивается только у ребенка. В тяжелых случаях и при отсутствии своевременной реакции плод может погибнуть еще в утробе или сразу после рождения.
Подготовка к процедуре и ее проведение
Для диагностики используют венозную кровь. Специальная длительная подготовка к проведению пробы Кумбса не требуется. Старайтесь соблюдать стандартный набор правил перед взятием крови из вены на анализ:
Метод исследования основан на реакции гемагглютинации.
При проведении прямой пробы на образец крови воздействуют заранее заготовленной антиглобулиновой сывороткой с известными показателями, выдерживают смесь некоторое время и проверяют на предмет агглютинатов, которые образуются при наличии на эритроцитах антител. Уровень содержания агглютинатов диагностируют с помощью агглютинирующего титра.
Непрямая проба Кумбса имеет сходную методику, но более сложную последовательность действий. В отделенную сыворотку крови вводят антигенные эритроциты (с резус-фактором) и только после этих манипуляций добавляют антиглобулиновую сыворотку для диагностики и титра агглютинатов.
Результаты исследования
В норме и прямая, и непрямая проба Кумбса должны давать отрицательный результат:
Справка! Антиглобулиновый тест отличается высокой чувствительностью, но имеет малую информативность. Он не регистрирует активность гемолитического процесса, не определяет тип антитела и не в состоянии выявить причину патологии. Для получения более полной картины, лечащий врач обязательно назначает дополнительные исследования (микроскопию крови, общий и биохимический анализ, ревмопробы, СОЭ, уровень железа и ферритина).
Причиной положительной пробы могут стать:
Ни одна из вышеперечисленных проблем не может быть решена пациентом без врачебной помощи. Во всех случаях потребуется срочная консультация, постановка на учет или экстренная госпитализация.
Внимание! В редких случаях возможна ложноположительная проба Кумбса. Причиной этого могут стать частые переливания крови, а также ряд заболеваний: ревматоидные артриты, красная волчанка, саркоидозы. Также это явление может наблюдаться после удаления селезенки, а также при нарушении хода реакции (частые встряхивания содержимого, наличие загрязняющих примесей).
Реакция кумбса прямая что это
Антиглобулиновый тест, который проводится для выявления антител, прикрепившихся к поверхности эритроцитов. Используется для диагностики аутоиммунной гемолитической анемии. С его помощью определяется наличие на мембранах эритроцитов IgG, которые могут активировать систему комплемента.
Кумбс-профиль, реакция Кумбса, антиглобулиновый тест.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Общая информация об исследовании
Под гемолитической анемией понимают заболевание, которое характеризуется внутриклеточным и внутрисосудистым разрушением эритроцитов. При аутоиммунных гемолитических анемиях образуются антитела к собственным антигенам эритроцитов. Гемолитическая анемия может быть вызвана рядом причин: использованием токсических средств и лекарственных препаратов, иммунной патологией, инфекциями, групповой несовместимостью при переливании крови и пр. При этом нарушено взаимодействие внутри иммунной системы, что приводит к восприятию организмом собственных эритроцитов как чужих. В лимфоузлах синтезируются антитела класса IgG и/или IgM, которые, присоединяясь к поверхности эритроцита, запускают ряд ферментов (систему комплемента) и повреждают стенку эритроцита, что приводит к его разрушению – гемолизу. Первые симптомы обусловлены и разрушением эритроцитов, и уменьшением гемоглобина: усталость, слабость, раздражительность, одышка, боль в животе и груди, тошнота, темный цвет мочи, боли в спине, желтушное окрашивание кожи и слизистых оболочек, увеличение печени, селезенки, снижение количества эритроцитов и гемоглобина в общем анализе крови.
Для диагностики аутоиммунной гемолитической анемии используется проба Кумбса. С помощью этого метода определяется наличие на мембранах эритроцитов, которые могут активировать систему комплемента. Тест направлен на выявление в крови неполных антиэритроцитарных антител к системе резус-фактора. Антитела к резус-фактору – специфические иммуноглобулины, которые вырабатываются в резус-отрицательной крови при попадании в нее эритроцитов с агглютиногенами D. Это может произойти при смешивании крови плода и беременной, при гемотрансфузиях, проведенных без предварительного типирования крови. Положительный результат пробы Кумбса подтверждает диагноз «аутоиммунная гемолитическая анемия», доказывая ее аутоиммунное происхождение. При этом отрицательный результат не позволяет снять диагноз.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Непрямая проба Кумбса
Описание
Непрямая проба Кумбса — непрямой антиглобулиновый тест. Он позволяет выявить атипичные антитела в плазме больных, в том числе аллоантитела, к чужим антигенам эритроцитов. Исследование выполняется когда прямая проба Кумбса оказалась отрицательной и антитела не были обнаружены.
Непрямой антиглобулиновый тест определяет анти-D, анти-С, анти-Е, анти-с и анти-е антитела к антигенам эритроцитов в плазме.
Исследование протекает в 2 этапа, поэтому и имеет название «непрямая проба».
На пером этапе антитела в сыворотке больного, которые не связаны с эритроцитами, фиксируют на эритроцитах здорового человека. Вторым этапом отмытые эритроциты донора группы 0(I) инкубируют с исследуемой сывороткой. Если в сыворотке присутствуют антитела, то они связываются с эритроцитами. Далее эти эритроциты обрабатывают антиглобулиновой сывороткой, которая содержит антитела против антител, т.е. фактически проводят прямую реакцию Кумбса. При появлении агглютинации проба расценивается как положительная непрямая проба Кумбса.
Положительный результат непрямой пробы Кумбса свидетельствует о возможных трудностях при подборе крови для переливания и проведении перекрёстной пробы на совместимость с консервированной кровью.
Накануне сдачи исследования нужно избегать физических нагрузок и стрессовых состояний.
Препараты, которые могут повлиять на результат пробы:
хинидин, метилдофа, цефалоспорины, сульфаниламиды, хлорпромазин, дифенилгидантоин, этосуксимид, гидралазин, леводопа, мефенаминовая кислота, мелфалан, пенициллин, прокаинамид, рифампин, стрептомицин, тетрациклины, изониазид.
Интерпретация результатов
В норме непрямая проба Кумбса отрицательная, что свидетельствует об отсутствии на поверхности эритроцитов антител и комплемента.